水果对衰老机体抗氧化防御体系功能的干预研究
郭长江,韦京豫,杨继军,徐 静,李云峰,蒋与刚,庞 伟
卫生学环境医学研究所,天津,300050
摘要 本研究采用旨在比较不同水果的抗氧化力, 探讨强抗氧化力与弱抗氧化力水果对老龄大鼠抗氧化防御体系功能的改善作用, 并进一步进行了老年人群的干预试验。研究中采用了反映抗氧化活性的FRAP法以及酶与非酶抗氧化指标,并从蛋白质、脂肪、DNA氧化损伤的角度评价了衰老机体抗氧化防御体系的功能状态。结果表明30种水果中,以山楂、冬枣、番石榴、猕猴桃、桑葚、草莓、石榴抗氧化活性较强,水果的抗氧化活性与总多酚和类黄酮含量有显著的相关关系,而与VC含量无显著的相关关系;采用抗氧化力较强的石榴干预可以明显改善老龄大鼠和老年人的抗氧化防御体系功能,抗氧化力较弱的苹果干预效果较差,因此,抗氧化力较强的水果有利于改善衰老机体的抗氧化防御体系功能。
关键词:水果;抗氧化力;衰老
1 前言
流行病学调查发现水果、蔬菜的摄入量与心脑血管疾病、肿瘤等的发病率、死亡率呈负相关关系,Lampe推测水果、蔬菜的抗氧化等作用可能为其发挥作用的机制[1]。国外一些体外试验证实许多水果、蔬菜对氧自由基有显著清除作用;国内也有类似报道, 如张佃志等报道水果中香蕉对超氧阴离子清除效果较好,潘碧霞等报道山楂、柿子对超氧阴离子的清除作用较强[2~5]。水果、蔬菜清除自由基的作用与它们富含抗氧化物质有关,如研究较多的维生素C、E、β-胡萝卜素等,许多动物试验和一些人群补充干预试验也已经取得了令人鼓舞的结果,但是,水果、蔬菜清除自由基的能力并不与它们维生素C、E或β-胡萝卜素的含量相关,而且,一些人群干预试验也出现了阴性结果[6,7],因此,水果、蔬菜中可能还含有其他抗氧化物质, 如近年来研究很多的类黄酮物质。
衰老是机体不可避免的生理过程,衰老时体内发生一系列生理生化变化,变化发生的机制目前尚不清楚,学说众多,其中,Harman于1956年提出的衰老自由基学说已经得到许多试验结果的支持。自由基是具有不对称电子的原子或分子的总称,来源于体内与体外,体内产生于代谢过程,体外产生于紫外线照射、吸烟、环境污染等,自由基的反应能力很强,可使细胞膜多不饱和脂肪酸发生过氧化,形成过氧化脂质,如丙二醛(MDA)等,造成生物膜损伤,自由基攻击还可使蛋白质、核酸等生物大分子发生修饰和交联,产生蛋白质羰基化合物和碱基修饰物、如 8-羟基鸟苷(8-OH-dG)等,从而影响正常生理功能。正常机体内存在酶和非酶系统抗氧化防御体系,酶系统包括超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)等,非酶系统主要指一些小分子的抗氧化剂,如维生素C、E、谷胱甘肽(GSH)等。随着年龄的增加,体内一些抗氧化物质含量减少,一些抗氧化酶活性下降,造成抗氧化防御体系功能的下降,导致自由基损伤随着年龄的增长而加剧,从而引起衰老,伴随一些慢性疾病的发生、发展,有研究结果表明生物衰老与体内SOD活性以及一些抗氧化物质的含量呈负相关,与活性氧的生成量呈正相关,采用细胞、果蝇、线虫、小鼠、大鼠等所进行的试验证实一些抗氧化物质确实能够延长细胞和动物的寿命,因此,寻找有效的抗氧化物质干预衰老一直是营养学家和老年医学工作者孜孜不倦追求的目标之一。既然一些水果具有较强的抗氧化力,富含许多天然抗氧化物质,因此,我们推测通过有目的地增加这些水果的摄入有可能改善衰老机体抗氧化防御体系功能,从而达到延缓衰老、预防慢性疾病发生、发展的目的[8,9]。
2 常见水果体外抗氧化活性的研究
2.1 体外抗氧化力测定
我们参照Benzie与Strain的方法[10],移植建立了FRAP法(ferric reducing/antioxidant power assay), 该法以1.0 mmol/L FeSO4为标准,样品抗氧化力以达到同样吸光度所需的FeSO4的毫摩尔数表示。
我们采用FRAP法对我国30种水果的抗氧化力进行了测定比较,水果包括山楂、冬枣、番石榴、猕猴桃、桑葚、草莓、石榴、芦柑、无籽青皮桔子、橙子、柠檬、樱桃、龙眼、菠萝果、红香蕉苹果、菠萝、香蕉、李子、荔枝、金桔、玫瑰葡萄、柚子、芒果、久保桃、杏子、哈密瓜、水晶梨、白兰瓜、京欣一号西瓜、柿子。所有样品用自来水、蒸馏水反复冲洗干净后,称取日常食用部分1~5克,在研钵内按1﹕9比例加入蒸馏水,研磨制备匀浆液,10000r/min离心10 min后取上清按FRAP法测定抗氧化力,每份样品重复测定5次。
测定结果表明山楂抗氧化力最强,冬枣、番石榴、猕猴桃、桑葚、草莓、石榴等次之,白兰瓜、京欣一号西瓜和柿子最弱,最强与最弱相差95.9倍(表1)。
表1 水果抗氧化力的比较
水果 n 抗氧化力(mmol/100g 鲜重)
山楂 5 13.42±0.74
冬枣 5 6.98±0.29
番石榴 5 6.07±0.69
猕猴桃 5 4.38±0.20
桑葚 5 4.11±0.25
草莓 5 3.29±0.30
石榴 5 3.10±0.12
芦柑 5 2.29±0.13
无籽青皮桔子 5 2.19±0.08
橙子 5 1.89±0.19
柠檬 5 1.43±0.07
樱桃 5 0.99±0.21
菠萝果 5 0.87±0.06
红香蕉苹果 5 0.80±0.05
菠萝 5 0.80±0.08
香蕉 5 0.73±0.11
李子 5 0.71±0.01
荔枝 5 0.59±0.11
金桔 5 0.50±0.05
玫瑰葡萄 5 0.49±0.04
柚子 5 0.39±0.03
芒果 5 0.38±0.08
久保桃 5 0.38±0.03
杏子 5 0.34±0.07
哈密瓜 5 0.24±0.06
水晶梨 5 0.22±0.03
白兰瓜 5 0.19±0.02
京欣一号西瓜 5 0.16±0.01
柿子 5 0.14±0.03
2.2 水果有关抗氧化物质含量与抗氧化力关系
我们采用二硝基苯肼比色法、Folin-Ciocalteu试剂还原法、铝离子显色法测定了山楂、猕猴桃、草莓、石榴、橙子、苹果、菠萝、梨中VC、总多酚、总类黄酮的含量, 并与水果的抗氧化力进行了相关分析, 结果表明水果的抗氧化力与VC含量无显著相关关系, 与总多酚、总类黄酮的含量有显著的相关关系(相关系数分别为0.9151、0.9144), 进一步分析表明不同水果中VC所占的抗氧化力比例变异很大(表2)。
水果 维生素Ca 计算FRAP 值b 占水果FRAP值百分比
(mg%) (mmol) (%)
山楂 53 0.80 5.95
冬枣 243 3.67 52.52
番石榴 68 1.03 16.92
猕猴桃 62 0.94 21.35
草莓 47 0.71 21.55
石榴 5 0.08 2.43
芦柑 19 0.29 12.52
无籽青皮桔子 28 0.42 19.18
橙子 33 0.50 26.34
柠檬 22 0.33 23.21
樱桃 10 0.15 15.24
龙眼 12 0.18 19.26
红香蕉苹果 3 0.05 5.66
菠萝 18 0.27 33.94
香蕉 8 0.12 16.53
李子 16 0.24 33.99
荔枝 41 0.62 104.83
金桔 35 0.53 105.60
玫瑰葡萄 4 0.06 12.31
柚子 23 0.35 88.96
芒果 23 0.35 91.30
久保桃 8 0.12 31.76
杏子 4 0.06 17.75
哈密瓜 12 0.18 75.43
京欣一号西瓜 7 0.11 66.0
柿子 10 0.15 107.75
a. 引自中国食物成分表2002, 杨月欣, 王光亚, 潘兴昌主编,
北京大学医学出版社2002,12。
b. 我们测定100mg 维生素C 相当于1.51mmol FRAP值。
3 不同抗氧化力水果汁对老龄大鼠抗氧化防御体系功能干预作用
3.1 动物与分组
老龄Wistar大鼠(20月龄左右)喂食正常饲料,随机分成三组,每组10头,雌雄各半,除了正常对照外,我们选择了抗氧化力较低的苹果和抗氧化力较强的石榴进行干预。
3.2 方案
每日下午灌胃1次。正常对照组灌胃蒸馏水;苹果汁组灌胃苹果汁,苹果为市售山东红富士品种,测定FRAP值平均为0.81mmol/100g,每天灌胃前采用榨汁机榨汁,每头灌胃2.4ml, 相当于4g的果肉;石榴汁组灌胃石榴汁,由山东平邑县大红石榴发展有限公司提供,测定FRAP值平均为2.23mmol/100g,每头灌胃3.2ml, 相当于4g的果肉。实验周期四周,实验前采空腹眼眶血测定外周血清抗氧化力、MDA水平、SOD、GSH-Px、CAT活性,结果三组动物之间无显著差异(结果略),实验结束时采空腹眼眶血测定外周血清抗氧化力、MDA水平、蛋白质羰基化合物含量、SOD、GSH-Px、CAT活性、VC、VE、GSH、ox-LDL含量、红细胞溶血
敏感性、外周血淋巴细胞DNA损伤以及肝心脑组织自由基含量和尿8-OH-dG排出量。
3.3 主要测定方法
外周血抗氧化力-FRAP法[10]
VC、VE、GSH-常规可见或荧光比色法
MDA-硫代巴比妥酸法[11]
蛋白质羰基化合物(Carbonyl)-DNPH比色法[12]
尿8-OH-dG-ELISA法,日本衰年控制研究所试剂盒
SOD-黄嘌呤氧化酶法,南京建成试剂盒
GSH-Px-DTNB比色法[13]
CAT-紫外比色法, 南京建成试剂盒
红细胞溶血敏感性-H2O2诱导法[14]
氧化型LDL(ox-LDL)-高速离心分离测定法[15]
肝心脑组织自由基水平-DCFH探针法[16]
淋巴细胞DNA损伤-彗星试验法[17]
3.4 统计分析
t 检验或方差分析。
3.5结果
3.5.1 实验前后体重变化
由表 3 可见,实验期间动物体重有所变化,但是, 实验前后或各组之间体重变化无显著差异。雌雄性别之间存在显著差异。石榴汁组有一动物试验期间因可疑肿瘤死亡。
表 3 动物实验前后体重比较(g)
组 别 n 开 始 结 束
正常对照组
雌 5 348.4±20.2 366.4±23.9
雄 5 521.8±38.8** 537.8±47.2**
苹果汁组
雌 5 352.2±28.3 361.3±30.8
雄 5 534.0±40.2** 538.6±28.2**
石榴汁组
雌 5a 353.8±36.4 378.2±54.0
雄 5 530.6±18.5** 525.6±23.1**
a. 一头动物试验期间因可疑肿瘤死亡。
t 检验:**p<0.01,与雌性比较。
3.5.2 血清抗氧化物质浓度
苹果汁、石榴汁对老龄动物血清VC、VE水平无显著影响,石榴汁组老龄动物血中GSH含量显著升高(表4)。
表 4 不同水果汁对血中VC、VE、GSH含量的影响
组 别 n VC(μg/ml) VE(μg/ml) GSH(mg/ml)
正常对照组 10 31.68±14.89 6.44±1.60 0.90±0.21
苹果汁组 10 29.70±15.25 5.11±1.77 0.93±0.08
石榴汁组 9 32.93±10.30 6.13±1.87 1.10±0.16*
方差分析后两两比较:*p<0.05, **p<0.01,与正常对照组比较。
3.5.3 血清抗氧化力和抗氧化酶活性
苹果汁、石榴汁具有升高老龄动物血清抗氧化力作用,石榴汁的升高作用具有统计学显著意义;苹果汁、石榴汁对血清SOD、GSH-Px、CAT活性的影响无统计学显著意义(表5)。
表 5 不同水果汁对血清抗氧化力和抗氧化酶活性的影响
组 别 n FRAP(mmol/L) SOD(U) GSH-Px(U) CAT(U/gHb)
正常对照组 10 0.79±0.10 331.24±44.86 569.56±36.38 340.6±112.1
苹果汁组 10 0.83±0.06 357.44±53.28 567.48±35.55 363.4±110.4
石榴汁组 9 0.90±0.13* 375.99±86.58 540.65±38.56 430.9±88.4
方差分析后两两比较:*p<0.05, 与正常对照组比较。
3.5.4 氧化产物
由表 6 可知,苹果汁、石榴汁对老龄动物血清MDA、尿8-OH-dG排出量无显著影响,但是,石榴汁对血清ox-LDL、羰基含量具有降低作用,并具有统计学显著意义,而苹果汁无显著作用。
表 6 不同水果汁对血清MDA、ox-LDL、羰基和尿8-OH-dG排出量的影响
组 别 n 血清MDA 血清ox-LDL 血清羰基 尿8-OH-dG
(μmol/L) (μmol/L) (μmol/ml) (ng/d)
正常对照组 10 35.85±17.97 3.04±0.52 65.9±20.0 254.7±107.7
苹果汁组 10 34.88±12.37 3.59±1.78 50.3±15.3 329.0±105.0
石榴汁组 9 37.83±11.87 2.03±0.43** 44.7±11.8* 275.6±79.5
方差分析后两两比较:*p<0.05, **p<0.01,与正常对照组比较。
3.5.5 肝心脑自由基水平
苹果汁、石榴汁对老龄动物肝脏、脑组织中自由基水平有一定的降低作用,其中,苹果汁、石榴汁对肝脏自由基水平以及石榴汁对脑组织中自由基水平的降低作用与对照组比较有显著性差异。苹果汁、石榴汁对老龄动物心脏自由基水平无显著影响(表7)。
表 7 不同水果汁对肝心脑自由基水平的影响(mmolH2O2当量/g wt)
组 别 n 肝 脏 心 脏 脑
正常对照组 10 1.59±0.22 0.37±0.10 1.10±0.34
苹果汁组 10 1.28±0.36* 0.34±0.07 1.04±0.23
石榴汁组 9 1.28±0.39* 0.32±0.12 0.85±0.23*
方差分析后两两比较:*p<0.05,与正常对照组比较。
3.5.6 红细胞溶血敏感性
由图 1 可见,苹果汁对老龄动物红细胞溶血敏感性没有明显影响,石榴汁对老龄动物红细胞溶血敏感性尽管有所下降,但是,与正常对照组比较差异没有统计学意义。
图 1 不同水果汁对老龄大鼠红细胞溶血敏感性的影响
苹果汁和石榴汁组老龄动物外周血淋巴细胞DNA损伤率均降低,与正常对照组比较具有显著的统计学意义;石榴汁组彗星尾长/总长比值显著低于正常对照组,苹果汁组与正常对照组相比差异无显著性(表8)。
表8 不同水果汁对老龄大鼠外周血淋巴细胞损伤率及彗星尾长/总长
比值的影响
组别 n 计数的细胞数 细胞损伤率(%) 尾长/总长 |
正常对照组 10 454 13.21±6.40 0.50±0.11
苹果汁组 10 798 9.01±4.31* 0.45±0.12
石榴汁组 10 591 8.11±3.54** 0.42±0.12* |
方差分析后两两比较:*P<0.05,**P<0.01与对照组比较。
3.6 结论
一个月的喂养试验结果表明抗氧化力较强的石榴汁具有显著提高老龄大鼠外周血抗氧化力、增加外周血GSH含量、降低蛋白羰基、肝脏与脑组织自由基水平和保护LDL、淋巴细胞DNA的作用,而抗氧化力较弱的苹果汁作用不明显或明显弱于石榴汁。此外,石榴汁对老龄大鼠外周血VC、VE水平无显著影响,表明石榴汁提高老龄大鼠外周血抗氧化力的作用与VC、VE无关。
4 不同抗氧化力水果汁对老年人抗氧化防御体系功能干预作用
4.1 干预方案
于2003年11月期间,选择天津市某居民区退休干部、职工27名,年龄在60-70岁左右,不吸烟,无严重高血压、心、肝、肾、肺疾病,志愿参加本试验工作,试验期间不服用任何抗氧化剂,试验前按中国营养学会颁布的“中国居民膳食指南”对参加试验的老年人膳食进行指导,规定不食用试验指定以外的水果或水果汁。由于志愿者反映试验期间很难保证不食用任何水果,因此,本试验没有设立空白组,只设立抗氧化力较低的苹果组和抗氧化力较强的石榴组。由于一些老人牙齿不太好,因此,采用水果原汁进行干预,其中,苹果原汁购自于天津大湖新鲜食品果汁有限公司,石榴原汁购自于山东大红石榴发展有限公司,两种水果原汁抗氧化力及有关抗氧化物质含量见表 9,由表 9 可见石榴汁的抗氧化力及主要抗氧化物质含量均强于或高于苹果汁,另外, 石榴汁含微量的β-胡萝卜素,苹果汁未测出。干预期间,为了了解两组营养素摄入情况,进行一次膳食调查,食物营养素含量按《中国食物成分表2002》计算。根据抽签结果,将志愿者随机分入苹果汁或石榴汁组,每人每天食用指定水果汁一次,剂量为250ml, 实验周期四周。干预期间石榴汁组有一位志愿者因病住院而退出试验,因此,实际每组参加人数为13人,两组人员的基本情况见表 10。
表 9 两种水果原汁抗氧化力及有关抗氧化物质含量
水果汁 FRAP VC 总多酚 总类黄酮 原花色素
(mmol/L)(mg%)(mg%) (mg%) (mg%)
苹果汁 3.06 10.98 22.0 9.2 3.4
石榴汁 5.41 7.19 112.3 17.4 18.2
表10 两组老年志愿者基本情况
项 目 苹果汁组 石榴汁组
年龄 62.8±4.7 64.1±4.3
性别(男/女) 10/3 10/3
身高(m) 1.66±0.05 1.66±0.04
体重(kg) 66.8±8.7 63.4±7.0
BMI(kg/m2)24.2±2.5 23.0±2.5
4.2 测定指标
实验前后测定空腹外周血抗氧化力、MDA水平、蛋白质羰基化合物含量、SOD、GSH- Px、CAT活性、维生素C、E、GSH、ox-LDL含量、红细胞溶血敏感性以及淋巴细胞DNA损伤程度, 收取晨尿,测定8-OH-dG与肌酐含量,除了ox-LDL采用美国TPI公司试剂盒测定外,其余测定方法同动物试验。干预第二、三周期间,采用24小时回顾法进行为期七天的膳食调查,其中包括一个星期六和星期天。
4.3 统计分析
采用 t 检验(正态分布数据)或秩和检验(非正态分布数据)分析两组之间和试验前后差异的显著性。
4.4 干预结果
4.4.1 两组老年志愿者膳食营养素摄入情况
除了维生素A两组摄入量有一定差异外,两组其余营养素摄入量均较为接近。两组脂肪、铁的摄入量偏高,分别达RNI的184%~190%、145%~154%;两组维生素E、钙摄入量偏低,仅分别为RNI的41%~42%、63%~72%(表11)。
表11 两组老年志愿者每日平均能量与营养素摄入情况比较
组别 n 能量 蛋白质 脂肪 钙 铁 锌 硒 VA VB1 VB2 VC VE
(kcal) (g) (g) (mg) (mg) (mg) (μg) (μg) (mg) (mg) (mg) (mg) |
苹果汁组 13 1992.19 87.68 45.95 717.0 23.16 13.39 56.55 843.21 1.18 1.20 91.64 5.91
石榴汁组 13 1950.76 81.02 47.56 628.8 21.83 12.26 47.05 625.0 1.12 1.10 94.53 5.80 |
4.4.2 血浆抗氧化物质浓度
苹果汁、石榴汁对老年志愿者血浆VC、VE、GSH水平均无显著影响,两组血浆VC水平试验结束时较试验开始均有所下降,可能与膳食摄入不充足和试验期间季节变化造成的影响有关(表12)。
表12 不同水果汁对志愿者血浆VC、VE、GSH含量的影响
组 别 n VC(mg%) VE(μg/ml) GSH(mg/L)
开始 结束 开始 结束 开始 结束
苹果汁组 13 0.90±0.20 0.53±0.13xx 14.06±2.34 12.20±2.05 189.45±26.91 199.96±27.78
石榴汁组 13 0.91±0.16 0.51±0.12 xx 15.50±2. 67 14.67±3.73 208.87±35.44 208.27±46.45
xx p<0.01, 与试验开始比较(配对 t 检验)。
4.4.3 血浆抗氧化力和抗氧化酶活性
石榴汁干预后,老年志愿者血浆抗氧化力(FRAP)显著升高,苹果汁无此作用;
两组老年志愿者血浆SOD、GSH-Px、CAT活性试验开始或结束差异无统计学显著意义,两组血浆GSH-Px、CAT活性试验结束时较试验开始均有所升高,原因不明(表13)。
表13 不同水果汁对志愿者血浆抗氧化力和抗氧化酶活性的影响
组 别 n FRAP(mmol/L) SOD(U) GSH-Px(U) CAT(U/gHb)
开始 结束 开始 结束 开始 结束 开始 结束
苹果组 13 1.37 1.36 91.34 81.26 624.49 700.49 1.44 2.74
±0.16 ±0.14 ±14.77 ±21.42 ±42. 93 ±50.25 xx±0.44 ±0.27 xx
石榴组 13 1.33 1.46 89.16 85.87 652.63 703.90 1.34 2.87
±0.18 ±0.26 x ±12.07 ±13.31 ±50.39 ±55.53 xx±0.43 ±0.39 xx
x p<0.05, xx p<0.01, 与试验开始比较(配对 t 检验)。
4.4.4 血浆氧化产物
由表 14 可知,两组老年志愿者血浆血浆MDA、ox-LDL含量试验开始或结束时差异无统计学显著意义,但是,MDA水平两组试验结束时均显著低于试验开始;另外,石榴汁对血浆羰基含量具有显著降低作用,而苹果汁无显著作用。
表14 不同水果汁对老年志愿者血浆MDA、ox-LDL、羰基含量的影响
血浆MDA 血浆ox-LDL 血浆羰基
组 别 n (μmol/L) (μmol/L) (μmol/ml)
开始 结束 开始 结束 开始 结束
苹果组 13 10.58±2.90 7.33±1.22xx 16.19±10.24 19.62±10.58 84.62±62.72 121.50±84.45 石榴组 13 9.10±2.30 6.78±1.98xx 19.17±9.85 19.97±13.26 89.61±83.42 76.75±43.81*
x p<0.05, xx p<0.01, 与试验开始比较(配对 t 检验);* p<0.05,与苹果汁组比较(秩和检验)。
4.4.5 红细胞溶血敏感性
由图 2 可见,苹果汁、石榴汁干预后老年志愿者红细胞溶血敏感性有所下降,但是,没有统计显著性意义。
图 2 不同水果汁对老年志愿者红细胞溶血敏感性的影响
4.4.6 尿8-OH-dG排出量与外周血淋巴细胞DNA损伤
表15 不同水果汁对老年志愿者尿8-OH-dG排出量与外周血淋巴细胞损伤的影响
组别 n 尿8-OH-dG 外周血淋巴细胞
(ng/mmol肌酐) 细胞损伤率(%) 尾长(μm) |
苹果汁组 13 824.41±343.66 21.82±13.77 9.83±1.11
石榴汁组 13 651.57±332.44 20.73±14.28 9.51±1.24 |
石榴汁组尿8-OH-dG排出量尽管低于苹果汁组,但是,秩和检验结果提示无显著性差异;外周血淋巴细胞DNA损伤两组之间差异也无显著的统计学意义(表15)。
4.5 结论
石榴汁的抗氧化力及主要抗氧化物质含量均强于或高于苹果汁,而且,动物干预试验也出现了令人鼓舞的结果。老年人连续四周饮用后的结果表明石榴汁能够在一定程度上改善老年人抗氧化防御系统功能,主要表现为显著提高外周血抗氧化力、降低血浆羰基含量,其他一些指标也显示了提高或改善的趋势,如果延长干预时间,效果可能更为明显。由于石榴汁富含多酚类物质,石榴汁干预后血浆VC、VE、GSH水平均无显著变化,因此,石榴汁中多酚类物质(包括类黄酮物质)可能是其中主要的功能性抗氧化活性物质。
5 主要研究结论
5.1 30种水果中, 抗氧化活性以山楂最强,冬枣、番石榴、猕猴桃、桑葚、草莓、石榴等次之,白兰瓜、京欣一号西瓜和柿子最弱;水果的抗氧化活性与总多酚和类黄酮含量有显著的相关关系,而与VC含量无显著的相关关系;不同水果中VC所占的抗氧化活性差异很大。
5.2 连续四周灌胃抗氧化活性较强的石榴汁能够明显改善老龄大鼠抗氧化防御系统功能,主要表现为显著提高外周血抗氧化力、降低血清羰基与ox-LDL含量、减轻淋巴细胞DNA的损伤,而抗氧化活性较弱的苹果汁作用较弱。
5.3 连续四周饮用抗氧化活性较强的石榴汁能够在一定程度上改善老年人抗氧化防御系统功能,主要表现为显著提高外周血抗氧化力、降低血浆羰基含量等,抗氧化活性较弱的苹果汁效果不甚明显。由于石榴汁富含多酚类物质,石榴汁干预后血浆VC、VE、GSH水平均无显著变化,因此,石榴汁中多酚类物质可能是其中主要的功能性抗氧化活性物质。有关多酚类物质中具体有效成分及其抗衰老作用的构效关系、作用机制尚有待进一步研究探讨。
6 参考文献
1 Lampe JW. Health effects of vegetables and fruits: assessing mechanism of action in human
experimental studies. Am J Clin Nutr, 1999,70(suppl):475s
2 Wang H, Cao G, Prior RL. Total antioxidant capacity of fruits. J Agric Food Chem, 1996,44:701
3 Cao G, Sofic E, Prior RL. Antioxidant capacity of tea and common vegetables. J Agric Food Chem, 1996,44:3426
4 张佃志,方允中. 某些蔬菜、水果的抗氧化活性观察. 营养学报, 1990,12:191
5 潘碧霞,高岷,陈红, 等. 36种蔬菜、水果清除超氧负离子活力的测定. 上海第二医科大学学报, 1993,13:210
6 Hennekens CH. Lack of effect of long-term supplementation with beta carotene on the incidence of malignant neoplasms and cardiovascular disease. N Engl J Med, 1996, 334:1145
7 Prieme H. No effect of supplementation with vitamin E, ascorbic acid, or coenzyme Q10 on oxidative damage estimated by 8-ox-7,8-dihydro-2'-deoxyquanosine excretion in smokers. Am J Clin Nutr, 1997, 65:503
8 Harman D. Aging: overview. Ann N Y Acad Sci 2001,928:1
9 Cutler RG. Antioxidants, aging and longevity. Free Radic Biol, 1984,5:371
10 Benzie IFF, Strain JJ. The ferric reducing ability of plasma as a measure of “antioxidant power”: the FRAP assay. Anal Biochem,1996;239:70
11 向荣,王鼎年. 过氧化脂质硫代巴比妥酸分光光度法的改进. 生物化学与生物物理进展,1990,17:241
12 Levine RL, Garland D, Oliver CN, et al. Determination of carbonyl content in oxidatively modified proteins. Methods Enzymol, 1990, 186: 464
13 唐稚麟,王红,朱莲珍. 测定人血中谷胱甘肽过氧化物酶方法的比较及其条件的探索. 卫生研究,1987,16:22
14 何文姗, 李琳, 郭祀远, 等. 生姜中一种新化合物的抗氧化活性. 中国病理生理杂志,2001,17:461
15 孙娟,刘尚喜,周玫, 等. 血浆LDL的快速提取和脂质过氧化物含量的测定. 第一军医大学学报,1994,14:56
16 LeBel CP, Ischiropoulos H, Bondy SC. Evaluation of the probe 2’,7’-dichlorofluorescin as an indicator of reactive oxygen species formation and oxidative stress. Chem Res Toxicol, 1992,5:227
17 Singh NP, McCoy MT, Tice RR, et al. A simple technique for quantitation of low levels of DNA damage in individual cells. Exp Cell Res, 1988, 175: 184
达能营养中心膳食营养研究与宣教基金项目DIC2002-09