达能营养中心第九届学术研讨会论文集

摘要：目的探讨水溶性辅酶Q10与维生素E协同作用对自然衰老小鼠抗氧化能力的影响。方法自然衰老小鼠随机分为正常对照组、维生素E组、辅酶Q10+维生素E组（100、200、600mg／kgBW）。实验结束后测血中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPX）的活力。结果：辅酶Q10与维生素E协同可显著提高衰老小鼠血中的SOD活性，明显降低MDA含量。结论辅酶Q10与维生素E协同可显著提高衰老小鼠的抗氧化能力，其抗氧化效果优于单独的维生素E。
关键词：辅酶Q10；维生素E；衰老小鼠；SOD；MDA

衰老是生命进程中机体各组织器官出现功能和形态退变的过程。辅酶Q10是真核生物细胞线粒体电子传递链的组成成分，参与氧化磷酸化，临床上主要用于心脏病的治疗，增加能量的供应［1］。辅酶Q10也是体内一个重要的还原剂，能清除自由基，减轻氧化损伤［2］。体内外的实验表明,维生素E是非常重要的阻断自由基链式反应的抗氧化剂［3］,能够预防和减轻体内细胞膜脂质过氧化物的破坏,保持组织的完整性,在生命活动中起着及其重要的作用［4］。迄今为止，脂溶性辅酶Q10的抗氧化作用已比较明确，而对水溶性辅酶Q10研究较少。本次试验通过对水溶性辅酶Q10和VitE在老龄鼠中抗氧化作用效果的比较，说明两者的协同作用。
1 材料与方法
11 材料
实验动物ICR老龄小鼠由中科院上海实验动物中心提供，实验动物生产许可证号为SCXK（沪）20020010，清洁级，雌性，为9月龄，实验前在动物房适应1个月。
受试物水溶性辅酶Q10和VitE的混合物（1∶1，m／m）及VitE均由浙江某公司提供。
试剂及仪器血红蛋白、MDA、SOD及GSHPX测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
12 方法
121 剂量设计实验设三个剂量组、阴性对照组和VitE对照组。低、中、高三个剂量分别为100、200、600mg／kgBW。
122 动物分组试验前取尾血，测丙二醛（MDA）值。实验时按MDA水平随机分组。
123 实验方法各组灌胃给受试物，每天一次，连续35天，对照组给蒸馏水，处理同受试物组，VitE对照组剂量为600mg／kgBW（用植物油为溶媒）。实验结束时内眦静脉采血，测定红细胞中超氧化物歧化酶（SOD）活力、谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPX）活力和MDA含量。
124 统计方法全部数据采用SPSS／PC软件包在微机上进行统计处理。
2 结果
21受试物对小鼠红细胞MDA含量的影响：结果见表1。与阴性对照组(蒸馏水)比较，三剂量组小鼠实验后红细胞MDA含量明显降低，差异均有显著性(q检验，P＜005)。其中辅酶Q10+VitE组对MDA含量的降低较VitE组效果更明显。

22受试物对小鼠红细胞SOD活力的影响：结果见表1。与阴性对照组(蒸馏水)比较，高剂量组小鼠实验后红细胞SOD活力明显增高，差异有显著性(q检验，P＜005)。
其中高剂量组的SOD活力较VitE组增高更明显。
23受试物对小鼠全血GSHPX活力的影响：结果见表1。三剂量组小鼠实验后全血GSHPX活力和阴性对照组(蒸馏水)比较,差异有显著性(方差分析，P＜005)，但各剂量组小鼠实验后全血GSHPX活力分别与阴性对照组(蒸馏水)比较，差异均无显著性(q检验，P＞005)。
24受试物对小鼠脏器／体重比值的影响：结果见表2。受试物三剂量组小鼠胸腺／体重比值、脾脏／体重比值与肝脏／体重比值和阴性对照组(H2O)比较，均无显著性差异(方差分析，P＞005)。

3 讨论
衰老的自由基学说［5］认为，自由基及其脂质过氧化物的代谢产物，如MDA能使蛋白质和DNA分子发生分子内和分子间的交联，造成DNA和蛋白质的损伤，加速衰老进程。正常情况下机体具有相应的酶系统来消除自由基，保护机体免受自由基的攻击。70年代以来，随着近代医学和营养学的发展，使人们对维生素E有了更为全面的了解。体内、外的实验表明，维生素E是非常重要的阻断自由基链式反应的抗氧化剂［6］，不但预防和减轻体内细胞膜脂质过氧化物的破坏，保持组织的完整性以及在生命活动中起着极其重要的作用。
机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基，后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid，PUFA）引发脂质过氧化作用，并因此形成脂质过氧化物。如：醛基（丙二醛MDA）、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基，以及新的氧自由基等。脂质过氧化物作用不仅把活性氧转化成活性化学剂，即非自由基性的脂类分解产物，而且通过链式或链式支链反应，放大活性氧的作用。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸（PUFA）的过氧化引起细胞损伤，而且还能通过脂氢过氧化物的分解引起细胞损伤。因而测试MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度，间接地反映出细胞的损伤的程度。超氧化物歧化酶（SOD）对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用，此酶能清除超氧阴离子自由基（O2—·）保护细胞免受损伤。
本试验结果表明, 水溶性辅酶Q10与VitE协同可使血SOD 的活性升高，MDA含量下降, 因此可以认为, 水溶性辅酶Q10与VitE协同可增强机体对自由基的清除能力, 抑制脂质过氧化, 减少MDA含量, 起到保护机体的作用, 从而可以对抗机体自然衰老中的退行性变，而其保护作用的效果优于单独的VitE。水溶性辅酶Q10与VitE协同时老龄小鼠胸腺／体重、脾脏／体重与肝脏／体重比值和阴性对照组(H2O)、VitE组比较，虽然未达到统计学差异，但在数值上三剂量组值均高于阴性对照组(H2O)、VitE组，说明水溶性辅酶Q10与VitE协同对老龄小鼠的免疫器官有一定的保护和促进作用。
4参考文献
［1］ 王怀颖,石少慧,张秋燕,王华琳,孙晓芳辅酶Q10对脑衰老影响的试验研究中国公共卫生,2004,20(11):1346-1347
［2］ Tomasetti M, Littarru GP, Stocker R, et al Coenzyme Q10 enrichment decreases oxidative DNA damage in human lymphocytes［J］ Free Radic Biol Med, 1999,27(9-10):1027-1032
［3］ EIKorotdova, OAAvramchik, TVKagiya. Study of antioxidant properties of watersoluble Vitamin E derivatetocopherol monoglucoside(TMG) by differential pulse voltammetry［J］. Talanta 2004, 52: 729-734.
［4］ 刘成梅,冯妹元,刘伟,涂宗财,梁瑞红. 天然维生素E及其抗氧化机理. 食品研究与开发, 2005, 26(6): 205-207.
［5］ Harman DA. Atheory based on free radical and radiation chemistry ［J］. J Gerontol, 1956, 11: 298.
［6］ E.I.Korotdova, O.A.Avramchik, T.V.Kagiya. Study of antioxidant properties of watersoluble Vitamin E derivatetocopherol monoglucoside(TMG) by differential pulse voltammetry［J］. Talanta 2004, 63: 729-734.氯化血红素铁治疗儿童缺铁性贫血效果评估