达能营养中心第九届学术研讨会论文集

摘要：目的对以葡萄籽油为主要原料组方的复方葡萄籽油进行润肠通便的功能研究。方法采用小鼠胃肠道及小肠推进运动，排便实验模型，研究复方葡萄籽油润肠通便的作用。结果在成功建立小鼠便秘模型的前提下、分别对试验组小鼠灌胃三个不同剂量复方葡萄籽油（低、中、高）12d，结果表明：复方葡萄籽油低、中、高三个剂量组均能显著增加小鼠胃肠蠕动功能，和便秘模型组比较、有极显著差异（P＜001）；各剂量组小鼠首次排便时间较便秘模型组明显减少（P＜001），6h排粪便颗粒及重量、各剂量组均较便秘模型组增多（P＜001），复方葡萄籽油对小鼠体重增长无不良影响。结论复方葡萄籽油具有较好的润肠通便功能、并呈现一定的“剂量－效应”关系。
关键词：复方葡萄籽油；润肠通便；试验研究

葡萄籽是酿造葡萄酒的付产物、葡萄籽中含有丰富的葡萄籽油及各种活性物质，其已被广泛运用于食品、保健品、药品及化妆品中。本文首次对生长于云南高原的葡萄籽油为主要原料组方的复方葡萄籽油进行润肠通便作用的研究，为拓宽葡萄籽的运用提供了科学数据。
1 材料与方法
11 材料
111 样品：复方葡萄籽油由云南高原生物资源开发有限公司提供、外观呈黄褐色、液态油状，有中药特殊气味，比重：088
112 溶剂：金龙鱼牌玉米胚芽油，广西防城港新海油脂工业有限公司生产，生产日期：20050829，淡黄色清亮透明无味的液态油，比重：085
113 复方地芬诺酯片：含盐酸地芬诺酯25mg／片，焦作市博爱药业有限公司生产、批号：04041602
114 墨汁：称取阿拉伯胶20g、加蒸馏水150ml，煮沸至溶液透明、加入活性炭粉10g、搅拌并反复煮沸3次，待溶液冷却后加水定容到200ml，置于40C冰箱保存、用前摇匀。
115 小鼠：云南省天然药物药理重点实验室提供二级ICR健康、成年、雄性小鼠、体重范围：18－22g，动物质量合格证号：滇实动证9805，小鼠颗粒饲料亦由该单位提供。
116 主要仪器：手术剪、眼科镊、直钢尺、1ml注射器、小鼠灌胃针、电子天平、平皿、小鼠笼具。
117 动物房环境：普通级标准动物房，温度：19－210C、湿度：50－60％。
12 试验设计
121 剂量设计和分组：以推荐人日常服用复方葡萄籽油量为30g／60kgbwd、初步设计相当于人体日常服用量10、20、30倍三个剂量组（复方葡萄籽油050、100、150g ／kgbwd）,另设空白对照、模型对照组，溶剂对照、溶剂模型对照，每个试验设7组、两个试验共计14组。按体重随机区组法分组、每组小鼠12只，试验前各组小鼠体重差异无显著性（P＞005）。
122 受试物给予方法及时间：用玉米胚芽油将复方葡萄籽油配置成所需三个浓度，采用经口灌胃的方式给予受试物，灌胃量为01ml／10gbwd。空白及模型对照灌胃等量蒸馏水、溶剂及溶剂模型对照灌胃等量玉米胚芽油，连续灌胃12d。
123 喂养：试验期间、小鼠自由摄食及饮水，于试验前、中期、结束称体重。
13 试验方法及操作
131 小肠推进试验：灌胃12d后、各组小鼠禁食24h（期间自由饮水），模型对照、溶剂模型对照及葡萄籽油三个剂量组按5mg／kgbw剂量灌胃给予复方地芬诺酯，空白对照灌胃蒸馏水、溶剂对照灌胃玉米胚芽油。05 h后复方葡萄籽油三个剂量组灌胃给予含受试物的墨汁，溶剂对照及溶剂模型对照灌胃给予含玉米胚芽油的墨汁，阴性、模型对照组灌胃给予墨汁（各组墨汁活性炭含量均为5％），灌胃量为02ml／10gbw。20分钟后立即颈椎脱臼处死小鼠，打开腹腔分离肠系膜、剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管置于玻璃板上、将肠管自然摆成直线，分别测量从幽门至墨汁前沿和幽门至回盲部距离，计算小肠推进率。
小肠推进率（％）=幽门至墨汁前沿长度（cm）／幽门至回盲部长度（cm）×100
132 排便试验：灌胃12d后、各组小鼠禁食24h（期间自由饮水），模型、溶剂模型对照及复方葡萄籽油三个剂量组按10mg／kgbw剂量灌胃给予复方地芬诺酯，空白对照灌胃蒸馏水，溶剂对照灌胃玉米胚芽油。05 h后复方葡萄籽油三个剂量组灌胃给予含受试物的墨汁，溶剂对照及溶剂模型对照灌胃给予含玉米胚芽油的墨汁，阴性、模型对照组灌胃给予墨汁（各组墨汁活性炭含量均为5％），灌胃量为02ml／10gbw。灌胃后、立即将小鼠单笼喂养，自由进食及饮水，记录每鼠首次排黑便时间及6h内排出粪便的总数及重量。
14 试验数据处理：所有试验结果均进行统计学处理。使用华西医科大学医百医统软（PEMS软件）中的方差分析、t检验
2 结果
21 复方葡萄籽油对小鼠体重的影响
给予复方葡萄籽油低、中、高三个剂量灌胃12d，各剂量组和对照组（空白、溶剂）比较、体重和增重无显著性差异（P＞005），见表1－2。

22 葡萄籽油对小鼠排便的影响
221 与空白对照组比较、模型对照组小鼠首次排便平均时间显著延长、有高度显著性差异（P＜001），6小时排便粒数及重量明显减少、有高度显著性差异（P＜001），说明便秘模型建立。
与模型对照组比较、复方葡萄籽油高剂量组首次平均排便时间显著减少（P＜001），各剂量组6小时排便数量无明显增加（P＞005），中、高剂量组6小时排出粪便重量明显增加（P＜005、P＜001），并呈现一定剂量-效应关系（见表3）。

222 与溶剂对照组比较、溶剂模型对照组小鼠首次排便平均时间显著延长、有高度显著性差异（P＜001），6小时排便粒数及重量明显减少、有高度显著性差异（P＜001），说明便秘模型建立。
与溶剂模型对照组比较、复方葡萄籽油各剂量组首次平均排便时间极显著减少（P＜001），各剂量组6小时排便数量及重量显著增加（P＜005、P＜001），并呈现一定剂量－效应关系（见表4）。

23 复方葡萄籽油对小鼠小肠推进率的影响
231 与空白对照组比较、模型对照组小鼠墨汁推进率显著降低（P＜001）、说明便秘模型建立，各剂量组墨汁推进率显著高于模型对照（P＜001）并呈现一定剂量－效应关系（表5）。

232 与溶剂对照组比较、溶剂模型对照组小鼠墨汁推进率显著降低（P＜001）、说明便秘模型建立，各剂量组墨汁推进率显著高于溶剂模型对照（P＜001）、并呈现一定剂量－效应关系（表6）。

3 结论
以推荐人日常服用复方葡萄籽油量为30g／60kgbwd、初步设计相当于人体日常服用量10、20、30倍三个剂量组（复方葡萄籽油050、100、150g ／kgbwd）经口灌胃给予小鼠12d、结果表明：
31 模型对照与空白对照比较、溶剂模型对照与溶剂对照比较，小肠平均推进率显著降低（P＜001）；平均首次排便时间显著延长（P＜001）、6h平均排便数量明显减少（P＜001）、6h平均排便重量明显降低（P＜001）；说明在本试验条件下、灌胃蒸馏水和灌胃溶剂（玉米胚芽油）的便秘模型均成功建立。
32 和空白对照组及溶剂对照组比较、复方葡萄籽油对小鼠体重增长无不良影响。
33 三个剂量组小鼠小肠墨汁平均推进率显著高于模型对照组（P＜001），说明复方葡萄籽油具有促进肠壁运动的功能（见表5、6）。
34 表3可见、和模型对照组比较、复方葡萄籽油高剂量组小鼠平均首次排便时间明显缩短（P＜001），中、高剂量组6h排便重量显著增加（P＜005、P＜001），但各剂量组6h排便数量未见增加（P＞005），说明高剂量复方葡萄籽油具有促进小鼠排便的功能。
35 表4可见、和溶剂模型对照组比较、复方葡萄籽油各剂量组小鼠平均首次排便时间明显缩短（P＜001）， 6h排便数量及重量显著增加（P＜001），说明各剂量组复方葡萄籽油均具有促进小鼠排便的功能。
4 讨论和建议
41 本次试验受试样品溶剂为玉米胚芽油，为排除溶剂对试验结果的干扰，在按常规设置灌胃蒸馏水的空白及模型对照组外、另增设灌胃玉米胚芽油的溶剂及溶剂模型对照组同时进行试验，均获得了阳性结果，证实了受试物润肠通便的功能与溶剂无关。
42 本次试验发现、灌胃水和油的两种便秘模型间首次排便时间6h排便数量和重量差异显著（P＜001），小肠墨汁推进率亦有明显差异（P＜005）。说明不同的材料对小鼠排便的影响不同。建议空白对照及模型对照应灌胃和受试物相同的溶剂更为合理。
参考文献
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