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几种不同钙化合物对大鼠铝、铅代谢的影响(摘录)
Influence of various calcium compounds on aluminium and lead metabolism in rats

王劲 柳启沛 黄宗枝1

(复旦大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室,上海200032;1 中科院原子核研究所,上海201800)

本实验研究通过分别给大鼠摄入柠檬酸钙、醋酸钙和碳酸钙,并同时外源性给予氢氧化铝和醋酸铅的情况下,观察不同钙化物对铝(Al)、铅(Pb)在大鼠肠道吸收及脏器中存留的影响。

1.材料与方法

    各组均采用合成饲料,参照AOAC[1]饲料配方,将其中碳酸钙用量调整到原用量的2/3,最终此合成饲料中钙含量为05%。其中1/3钙用量按钙元素含量折算成相应钙化合物用量溶于灌胃液中。
    选用5周(体重60~90g)的健康SpragueDawley大鼠。适应性喂养剔除体重过高或过低者,将合乎要求的30只大鼠(雌雄各半),按体重配对分成3组:柠檬酸钙+铝+铅组;醋酸钙+铝+铅组;碳酸钙+铝+铅组,各组钙含量均为125%(灌胃液)。3组大鼠体重差异无显著性(P>0.05)。
    实验期28天。动物分组后单笼饲养于不锈钢丝笼内,自由摄食和饮水,自然光照,实验期控制饲养室内合适温度和相对湿度。各组动物均饲以相同合成饲料,每天用相应钙化合物和铝、铅的混悬液(2ml/100gbw)给各组大鼠灌胃,灌胃前充分摇匀灌胃液(100ml混悬液含有125g钙、50mg铅、500mg铝)。大鼠饮水量以每摄入1g饲料饮2ml水计算。[2]
    实验结束前四天,收集3d粪便,称重并记录。在实验期末称动物体重,停食12h,以乙醚麻醉动物,由心尖部穿刺采血。采血后,分别摘取每只大鼠的全肝、双肾、大脑及左侧股骨。采样和测定所用的玻璃器皿或塑料容器均经去金属离子污染处理。
    用ICAP9000型直读式电感耦合高频氩等离子体焰炬发射光谱仪(美国TJL公司产),电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICPAES)测定上述两种元素。[3]选用TBW09101人发成分分析标准物质,进行质量控制。

2.结果

2.1 实验动物体重增重、饲料利用率(表1)、脏器系

    数(表2)和Al、Pb的表观吸收率(表3)
    雌、雄性大鼠4周增重、饲料消耗量、饲料利用率和脏器系数各组间差异无显著性。雌、雄性大鼠分开统计分析,性别间差异的规律性不明显,故将雌、雄性大鼠合并统计。大鼠Al、Pb的摄入量各组间均无显著性差异。Al的表观吸收率各组间差异无显著性;Pb的表观吸收率具有醋酸钙组>柠檬酸钙组>碳酸钙组的趋势。

2.2 体组织中Al、Pb含量(表4、表5)
全血中Al:醋酸钙组>柠檬酸钙组和碳酸钙组。大脑和股骨中Al:柠檬酸钙组和醋酸钙组>碳酸钙组。肝和肾中Al:各组间差异无显著性。
肾中Pb有醋酸钙组>柠檬酸钙组>碳酸钙组的趋势。大脑和股骨中Pb:柠檬酸钙组和醋酸钙组>碳酸钙组。全血和肝中Pb:各组间差异无显著性。


3.讨论

    本研究通过灌胃,分别给雌雄性SpragueDawley大鼠摄入碳酸钙、柠檬酸钙和醋酸钙3种钙化合物及氢氧化铝和醋酸铅,结果未见对大鼠生长发育有不同影响,并且对脏器增重的影响亦无差异。
    本次实验的铝、铅吸收率均为负值,可能的解释原因是:服用钙剂可能会促进体内原先蓄积的铝、铅大量排出,或可能生长发育期大鼠体内物质更新转换很快,体内铝、铅经肠道粘膜细胞脱落和胆汁迅速排入肠道,从而出现铝、铅的粪中排出量远远大于摄入量等。由此导致Al、Pb的粪便中排出量远高于其摄入量,从而其表观吸收率出现负值。

3.1 铝吸收及其在组织中含量

    从大鼠代谢实验中可见,分别摄入3种钙化合物的大鼠组对铝的表观吸收率的影响无差别。全血及大脑、股骨中铝浓度以柠檬酸钙组和醋酸钙组均高于碳酸钙组动物。与Slanina[4]的动物实验和Nolan[5]的人体试验研究柠檬酸(盐)对铝吸收和蓄积的结果一致,但与Nolan[6]的人体试验研究醋酸钙和柠檬酸钙对铝吸收影响的结果不完全一致,Nolan的研究表明,醋酸钙摄入不增加人体铝的吸收。其原因是否动物实验摄入铝的剂量较高于人体膳食中铝的摄入量,或种属不同、或存在与铝竞争性吸收的膳食成分等,尚需进一步探讨。

    在体外实验,柠檬酸盐增加铝吸收的机制有两个:其一,柠檬酸根离子在肠道的碱性环境中与Al(H2O)63+形成可溶性金属-配合体络合物,因而提供了一种利于铝吸收的溶解形式;其二,柠檬酸盐有效地络合了细胞外钙(细胞外钙对于维持细胞间紧密结完整性具有重要意义),因而通过开放细胞间紧密结,使铝经细胞旁路显著地提高了其吸收。
    同时,本研究还发现肾中铝含量,3组差别不显著,但有碳酸钙组高于柠檬酸钙组和醋酸钙组的趋势,结合碳酸钙组的大鼠全血、大脑和股骨中铝较低,提示或许碳酸钙比另两种钙化合物更利于铝通过尿排出。
    本次实验证实铝主要蓄积在骨与脑中,这表现在这两种脏器的铝含量较高,这也提示铝的主要靶器官是神经系统和骨骼,铝过量易造成上述两种器官的损伤和病变。

3.2 铅吸收及组织中含量

    大鼠摄入醋酸钙和柠檬酸钙比摄入碳酸钙对铅的吸收率高,尤以醋酸钙为甚。以往的动物实验表明[7],柠檬酸盐、抗坏血酸盐增加大鼠消化道铅吸收,但钙、铁和锌等阳离子会减少铅吸收。而人体试验又发现[5],补充柠檬酸钙对肾功能正常的妇女不增加其膳食中铅的吸收。因此,可进一步确定动物及人体摄入不同钙剂对铅吸收的最终影响效果。
    本次实验表明,醋酸钙组和柠檬酸钙组比碳酸钙组的大鼠脑铅、骨铅含量高,全血及肝中铅差别不显著;醋酸钙组的肾铅明显高于碳酸钙组,柠檬酸钙组与其余两组差异均不显著,但有居于两者之间的趋势。这与大鼠代谢吸收实验一致,说明铅易蓄积在肾、脑和骨,是铅的主要毒作用靶器官。
    铝在周围环境中普遍存在,人类广泛地通过医源性和生活性接触铝,长期大量接触主要表现为中枢神经系统、骨骼和造血系统的损害[8]。而铅是工业化社会广泛而长期存在的重金属污染物,其低浓度摄入对神经组织可能产生代谢及传导异常的影响[8],尤其是对儿童智能、行为的影响[9],已引起人们很大的关注。因此,选用柠檬酸钙和醋酸钙两种钙化合物作为补钙剂,可能不利于铝和铅从体内排出,从而对维护骨骼和神经系统的健康存在负面效应。相对而言,碳酸钙作为补钙剂可能更为安全。

参考文献:
1 周同惠主编 国际标准常规分析方法大全\[M\] 北京∶科学出版社, 1998,724-725
2 郝光荣主编 实验动物学\[M\] 上海∶第二军医大学出版社,1998,121
3 谢幼丽,黄葵,高舸 ICPAES法测定茶叶中铅、砷、铜\[J\] 四川省卫生管理干部学院学报,1998,17(4):205-206
4  Slanina P,Falkeborn Y Aluminium concentrations in the brain and bone of rats fed citric acid,aluminium citrate or aluminium hydroxide\[J\] Food Chem Toxic,1984,22(5):391-397
5 Nolan CR,Degoes J J  Aluminium and lead absorption from dietary sources in women ingesting calcium citrate\[J\] South Med J,1994,87(9):894-898
6 Nolan CR,Califano JR,Butzin CA Influence of calcium acetate or calcium citrate on intestinal aluminium absorption\[J\] Kidney Int,1990,38:937-941
7Conrad ME,Barton JDC Factors affecting the absorption and excretion of lead in the rat\[J\] Gastroenterology,1978,74:731-740
8 朱莲珍主译校 人和动物的微量元素营养\[M\] 山东∶青岛出版社,1994:615-619;631-632;698-707
9祁嘉义主编 临床元素化学\[M\] 北京∶化学工业出版社,2000:186-187