达能营养中心第九届学术研讨会论文集

华炜
(浙江省疾病预防控制中心毒理检验所,杭州,310009)

摘要:目的探讨茶蛋白的降血脂及抗氧化作用。方法观察不同剂量的茶蛋白对高脂大鼠血清TG、TC、HDL-C及衰老模型小鼠血液SOD、MDA、GSHPX的影响。结果高脂大鼠灌胃七周后,与高脂对照组比较茶蛋白10g/kg.bw、20g/kg.bw剂量组能显著降低血液中TG、TC含量;老龄小鼠与衰老模型组比较, 茶蛋白10g/kg.bw、20g/kg.bw剂量组能显著降低血液中MDA含量,且茶蛋白10g/kg.bw剂量组能明显升高血液中SOD的活性;血液中GSHPX含量基本无变化。结论茶蛋白具有一定的降血脂及抗氧化作用。
关键词:茶蛋白;降血脂;抗氧化

Effects of Tea Protein on reducing blood fat and oxidation resisting
Hua Wei
(ZheJiang Center for Disease Prevention and Control, Hangzhou 310009,China)

Abstract: Objective To study the effects of tea protein on reducing blood fat and oxidation resisting . MethodsThe changes of TG、TC、HDLC in blood serum of high blood fat rat and SOD、MDA、GSHPX in blood of aged model mice were observed after administered tea protein at different doses .Result Tea protein at the doses of 10g/kg.bw and 20g/kg.bw could significantly decrease the contents of TG、TC in blood compared with control group, after high blood fat rat had been administered tea protein for seven weeks. Tea protein could significantly reduce the contents of MDA in blood at the doses of 10g/kg.bw and 20g/kg. bw compared with aged model group.And it could markedly increase the activity of SOD in blood at the dose of 10g/kg.bw.But GSHPX in blood didn't change significantly. ConclusionTea protein has some effects on reducing blood fat and oxidation resisting.
Keywords: Tea protein; Reducing blood fat; Oxidation resisting

医学研究表明,高脂血症和高脂质过氧化物含量是导致动脉粥样硬化的重要因素。因此降低血脂和脂质过氧化物含量是防止动脉粥样硬化发生、预防心脑血管疾病的重要措施。中国是世界上最大的茶叶产地之一,茶叶资源十分丰富。茶叶对人体具有多种生物学功能,如抗癌、降血脂和抗氧化等功能[1-4],这些生物学功能是以茶叶所含的多种有机和无机物质为基础的,如茶多酚、茶多糖、茶色素、茶蛋白等。茶蛋白粉中粗蛋白含量达到50%,并含有17种氨基酸[5]。有研究表明茶蛋白对预防放射治疗时引起的致突变效应有保护作用[6],但对其降血脂及抗氧化功效研究却鲜见报道。因此本文对茶蛋白降血脂及抗氧化作用等方面进行了研究。
1 材料与方法
11 材料
111 受试物茶蛋白,用碱法从茶碴中分离提取,由浙江某工程技术学院提供,棕褐色浓稠液体。本实验以蒸馏水为溶媒,配成各剂量浓度供试。
112 实验动物SD雄性大鼠(后简称大鼠)40只,体重范围:160-200g;SPF级昆明种雄性老龄小鼠(后简称老龄鼠)50只,6月龄,体重范围:40-60g,均由浙江省实验动物中心(生产许可证号:SCXK(浙)2003-0001)提供。
113 饲料基础饲料:由浙江省实验动物中心提供。高脂饲料配制:用90.5%基础饲料、2%胆固醇、0.5%胆盐、7%猪油配制而成。
114 主要仪器与试剂Backman Foxpro CX4型全自动生化分析仪、721B型分光光度计、低温高速离心机等; MDA、SOD、GSH-PX测定试剂盒,由南京建成生物工程研究所提供,批号20040714。
12 方法
121 辅助降血脂功能实验方法在实验环境下大鼠喂饲基础饲料观察10d,取尾血,测定血清总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。 正式实验开始后,各组动物用高脂饲料喂饲10d后,取尾血,再测定血清TC、TG、HDLC水平,确定高脂血症模型建立后, 再根据TC水平,随机分为1个高脂对照组、3个受试物剂量组,3个受试物剂量分别经口灌胃给予5g/kg.bw、10g/kg.bw和20g/kg.bw的茶蛋白,为期七周,高脂对照组给同体积的蒸馏水,全程均给予高脂饲料,并每周称量动物体重,并根据体重调整给药量,于实验结束禁食16h,测定血清TC、TG、HDL-C水平。
122 抗氧化功能实验方法雄性老龄鼠在动物房适应一周后,眼内眦静脉取血,测定MDA、SOD、GSH-PX。按MDA水平分组。随机分为1个模型对照组、3个受试物剂量组和一个阳性对照组,每组10只小鼠。模型对照组给予蒸馏水,3个受试物剂量组分别给予5g/kg.bw、10g/kg.bw和20g/kgbw的茶蛋白,阳性对照组给予25mg/kg.bw的维生素E油溶液。各实验组小鼠均以灌胃方式给药,灌胃容量为20ml/kg.bw。连续灌胃60d,每周称量动物体重,并根据体重调整给药量,实验期末眼内眦静脉取血观察生化指标变化。
123 测定指标TC、TG、HDL-C;MDA、 SOD、 GSH-PX。
124 数据处理实验数据统计采用SPSS11.5软件包。
2 实验结果
21 辅助降血脂功能实验结果
211 大鼠常规喂饲基础饲料10d,测得大鼠血清TC基础值为1.77±0.21mmol/L。喂饲高脂饲料10d后,测得大鼠血清TC值为3.10±0.45mmol/L,与基础值差别有统计学意义(t=-17711,P=2.625E-32),大鼠实验性高脂血症模型建立。
212 高脂血症大鼠模型建立后,观察给受试物对高血脂血症大鼠体重的影响, 结果见表1, 给受试物前与给受试物4周、7周后,高、中、低三剂量组大鼠体重及体重增重和高脂对照组相比较, 差异均无统计学意义(方差分析, P>0.05)。

213 大鼠实验性高脂血症模型建立后, 继续给予高脂饲料,分别于给受试物后的第4周、第7周末, 测定血清TC, 结果见表2,在第4周末中、高剂量组高脂血症大鼠血清TC含量与高脂对照组相比较,差异有统计学意义(q检验, P<0.05);在给受试物第7周末时中、高剂量组高脂血症大鼠血清TC含量进一步降低,差异有统计学意义(q检验,P<0.01)。

214 大鼠实验性高脂血症模型建立后,继续给予高脂饲料,分别于给受试物后的第4周、第7周时, 测定血清TG,结果见表3,在给受试物第7周末时中、高剂量组高脂血症大鼠血清TG含量明显低于高脂对照组,差异有统计学意义(q检验, P<0.05)。

215 大鼠实验性高脂血症模型建立后, 继续给予高脂饲料, 分别于给受试物后的第4周、第7周时, 测定血清HDL-C,结果见表4, 在第4周、第7周末时,低、中、高剂量组高脂血症大鼠血清HDL-C值和高脂对照组大鼠比较,差异均无统计学意义(方差分析, P>0.05)。


22 抗氧化功能实验方法结果
221 受试物对老龄鼠体重的影响(表1)给受试物前、给受试物30d后,给受试物60d后,低、中、高3个剂量组及阳性对照组老龄小鼠体重与模型对照组比较,差异无统计学意义(方差分析,P>0.05)。说明经不同处理对小鼠体重无显著影响,受试物对小鼠生长无明显影响。

222 受试物对老龄鼠血液MDA水平的影响(表2)给受试物前,各实验组小鼠血液MDA水平与模型对照组比较,差异无统计学意义(方差分析,P>0.05)。给受试物60d后,高剂量组、阳性对照组小鼠血液MDA水平明显低于模型对照组,差异有统计学意义(方差分析, p<0.05)。

223 受试物对老龄鼠血液SOD水平的影响(表3)给受试物前,各实验组小鼠血液SOD水平与模型对照组比较,差异无统计学意义(方差分析, P>0.05)。给受试物60d后,中剂量组、阳性对照组小鼠血液SOD水平明显低于模型对照组,差异有统计学意义(方差分析, p<0.05)。
224 受试物对老龄鼠血液GSH-PX(表4)给受试物前与给受试物60d后,各剂量组和阳性对照组小鼠血液GSHPX水平与模型对照组比较,差异无统计学意义(方差分析,P>0.05)。


 

3 讨论
随着人们生活水平的不断提升,防止高脂血症和延缓衰老日益成为百姓和学者共同关注的热门话题和研究领域。高脂血症对人体的损害呈现隐匿、逐渐、进行性和全身性,它也是脑卒中、冠心病、心肌梗死、心脏猝死独立而重要的危险因素。因此,人们称之为导致心血管疾病的“导火线”。而衰老更是一种复杂的生命现象,也是体内各种生化反应的综合过程。随着年龄的增长,自由基的产生逐渐增多,清除自由基的相关酶类的活性下降,机体内过量的氧自由基会对机体内的脂质、核酸、蛋白质等生命大分子造成损害[7],引起许多重要的抗氧化酶活性的丧失[8]。机体内的SOD可催化氧自由基的歧化反应,是机体清除氧自由基的重要酶类。当机体由于老化、创伤等原因造成氧自由基产生增加,而同时组织中SOD活性降低时,就会导致氧自由基堆积,引起脂质过氧化作用增强,促进细胞膜上的不饱和脂肪酸的产生过氧化反应,使体内的MDA等过氧化产物的含量增加[9],最终导致细胞受损,机体逐渐趋向衰老[10]。因此,抗氧化是机体抗衰老的重要一环, SOD和MDA则是衡量抗衰老药物的重要实验指标[11] 。VE是天然的脂溶性抗氧化剂,主要存在细胞膜性结构中,VE不但是单线态氧和O-的清除剂,更重要的是脂质过氧化作用的阻断剂,故在本实验中将其作为阳性对照药。
根据实验结果,茶蛋白给予高脂大鼠灌胃四周后,中、高剂量组高脂血症大鼠血清TC含量与高脂对照组相比较,差异有显著性(P<0.05);在给受试物第7周末时中、高剂量组高脂血症大鼠血清TC含量进一步降低,差异有统计学意义(P<0.01);同时在给受试物第7周末时中、高剂量组高脂血症大鼠血清TG含量明显低于高脂对照组,差异有统计学意义(P<0.05),表明茶蛋白对于高脂血症大鼠血清TC的影响随着灌胃时间延长至七周时,逐渐呈现出辅助降血脂功效,显示出茶蛋白所具有的独特的缓慢过程,但低、中、高剂量组高脂血症大鼠血清HDL-C值和高脂对照组大鼠比较,差异均无统计学意义,表明与其他具有降低血清TC、TG含量而同时降低血清HDL-C功效的成分相比而言,更能有效地防止动脉粥样硬化发生、预防心脑血管疾病。
而茶蛋白10g/kg.bw剂量组能提高老龄小鼠红细胞中SOD的活力(P<0.01),但不存在着明显的剂量反应关系表明它可使机体清除自由基的能力增强。而茶蛋白低、中、高剂量组却能明显降低老龄小鼠血浆脂质过氧化物丙二醛含量,并显示出一定的剂量反应关系,表明茶蛋白可减轻机体脂质过氧化反应、降低生物膜的过氧化程度,减轻机体代谢过程中氧化还原反应产生的自由基对机体的损害,从而起到预防和延缓机体衰老的抗氧化作用。
参考文献
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