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摘要
为探讨胚胎细胞凋亡在同型半胱氨酸（homocysteine, HCY）致胚胎神经管畸形和先天性心脏畸形中的作用，作者建立了2种鸡胚胎定位注射技术，观察HCY对6日龄胚胎的发育毒性。采用流式细胞仪、组织病理、透射电镜、原位末端标记、甲绿-派若宁双染DNA和RNA方法，探讨HCY激发细胞凋亡在畸胎发生中的作用。应用HPLC法检测胚胎血浆总HCY水平的变化。结果不同位点微注射HCY（4~8μmol/胚胎）后，均可造成胚胎中枢神经系统和心脏畸形，但其所至后果不同。畸形的主要表现是异位心、心包积液、心内膜垫缺损、脑膨出、脑裂和小头等，其它表现还有体位异常、发育迟缓和死亡。HCY能明显干扰胚胎细胞周期，抑制胚胎细胞DNA和RNA的合成。在胚胎脑和心脏区域，观察到凋亡的神经细胞、心肌细胞及血管内皮细胞等，均明显高于正常对照组。发现HCY所致细胞线粒体的变异（例如：线粒体肿胀、气球样变、嵴损伤及电子密度增高等）与胚胎细胞凋亡关系密切。胚外膜滴注HCY后，胚胎血浆HCY在120分钟时达高峰值（80.58μmol/L），显著高于正常对照组；同时滴注叶酸（5μg/胚胎）可明显降低血浆HCY水平。结论：HCY是一种新的细胞毒物，它能激发早期胚胎细胞凋亡过度，而且细胞凋亡部位多与病变部位相吻合，说明HCY-凋亡-出生缺陷形成三者间存在一定关联。线粒体形态变异是胚胎细胞凋亡的早期改变，它可能在胚胎细胞凋亡过程中起重要作用。
关键词 同型半胱氨酸 细胞凋亡 细胞周期 DNA 线粒体 心脏畸形 神经管畸形
中图分类号 Q593.4 Q132.7 Q517 | 